期刊简介

  本刊是经原国家科委批准,由中国科协主管、中国药理学会主办的全国性学术性月刊。是国家最有影响的核心期刊和论文评价的文献源期刊之一,影响因子和被引总频次位居全国药学类期刊前列。是国家百种重点期刊、优秀期刊和华东地区最佳期刊。被国际上CA、JA、EM、IG、BA等著名检索系统收录。从1999年起接受中国科协和国家自然科学基金资助,2006—2013年受到中国科协精品期刊工程示范项目资助;2006-2013年因影响因子列药学类期刊第一名获“百种中国杰出学术期刊”称号。主要刊登药理学研究论文。投稿本刊请将论文发到zgylxtb8@163.com并按自动回复办理即可。本刊2012年最新论文查询请见http://c.wanfangdata.com.cn/Periodical-zgylxtb.aspx和http://med.wanfangdata.com.cn/Journal/zgylxtb.aspx”

         

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  • 杂志名称:中国药理学通报杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国药理学会
  • 国际刊号:1001-1978
  • 国内刊号:34-1086/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:国家期刊奖百种重点期刊(2003,2005);中国科协精品期刊工程项目资助期刊(2006-2011);百种中国杰出学术期刊(2006-2013);中国科技精品期刊(2008,2011连续2届);RCCSE权威期刊药学类连续三届第一名;影响因子、总被引频次、基金论文比近年来均列我国药学类期刊第一期刊收录:北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美)
中国药理学通报杂志2016年第12期

RIP140重组腺病毒的构建及在乳鼠心肌细胞中的表达

陈艳芳;王若伦;刘培庆

关键词:腺病毒, 同源重组, 感染复数, 细胞病理效应, 半数组织感染剂量, 心肌细胞
摘要:目的:原代乳鼠心肌细胞为终末期的分化细胞,常规的质粒转染效率低下。受体相互作用蛋白140(receptor-in-teracting protein 140,RIP140)目的基因长达3.5kb,为研究RIP140蛋白在非增殖型的心肌细胞表达情况,需要寻找一种更好的过表达系统。方法 RIP140基因全长序列克隆入pAdTrack-CMV穿梭载体中,在BJ5183细菌中与腺病毒骨架载体pAdEasy-1进行同源重组。经酶切及测序验证的阳性重组克隆转染入AD293细胞中进行病毒的包装与扩增。采用TCID50法测定病毒滴度、CCK-8试剂盒分析腺病毒对心肌细胞活力的影响。采用Western blot鉴定RIP140蛋白在心肌细胞中的表达情况。结果测序分析结果表明RIP140的全长序列正确克隆到 AdEasyTM腺病毒系统中。Ad-RIP140、Ad-GFP 的病毒滴度分别为1011.3和1011.7 PFU · mL-1。腺病毒感染复数在200以下时,对心肌细胞活力无影响。绿色荧光及Western blot分析显示Ad-RIP140感染心肌细胞12 h,RIP140表达明显增加(P<0.05)。结论成功构建了RIP140全长序列的腺病毒载体,并使其蛋白有效表达于心肌细胞中,这将有助于后续进行RIP140在心肌细胞中的作用的研究。