期刊简介

　　本刊是经原国家科委批准，由中国科协主管、中国药理学会主办的全国性学术性月刊。是国家最有影响的核心期刊和论文评价的文献源期刊之一，影响因子和被引总频次位居全国药学类期刊前列。是国家百种重点期刊、优秀期刊和华东地区最佳期刊。被国际上CA、JA、EM、IG、BA等著名检索系统收录。从1999年起接受中国科协和国家自然科学基金资助，2006—2013年受到中国科协精品期刊工程示范项目资助;2006-2013年因影响因子列药学类期刊第一名获“百种中国杰出学术期刊”称号。主要刊登药理学研究论文。投稿本刊请将论文发到zgylxtb8@163.com并按自动回复办理即可。本刊2012年最新论文查询请见http://c.wanfangdata.com.cn/Periodical-zgylxtb.aspx和http://med.wanfangdata.com.cn/Journal/zgylxtb.aspx”

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杂志名称：中国药理学通报杂志
主管单位：中国科学技术协会
主办单位：中国药理学会
国际刊号：1001-1978
国内刊号：34-1086/R
出版周期：月刊

期刊荣誉：国家期刊奖百种重点期刊（2003，2005）；中国科协精品期刊工程项目资助期刊（2006-2011）；百种中国杰出学术期刊（2006-2013）；中国科技精品期刊（2008，2011连续2届）；RCCSE权威期刊药学类连续三届第一名；影响因子、总被引频次、基金论文比近年来均列我国药学类期刊第一期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美)

中国药理学通报杂志2015年第02期

Tat-LK15运载siRNA沉默RGC-5神经细胞nNOS基因的实验研究

彭捷；饶云；陆建华；吴昊澎；杨秀环；屠伟峰

关键词：细胞穿透肽, TAT, siRNA, 基因治疗, 神经型一氧化氮合酶, 神经病理性疼痛

摘要：目的：探讨离体条件下细胞穿透肽Tat-LK15运载小干扰RNA( small interference RNA,siRNA)沉默RGC-5视神经节细胞(retinal ganglion cell line, RGC-5)神经元型一氧化氮合酶( neuronal nitric oxide synthase, nNOS)基因的可行性,为在体条件下研究Tat-LK15运载siRNA沉默nNOS表达治疗神经病理性疼痛提供理论依据。方法①通过凝胶阻滞分析测定Tat-LK15与siRNA的佳交联比。流式细胞术检测Tat-LK15/ FAM-siRNA以佳交联比转染RGC-5细胞的转染效率；不同剂量 Tat-LK15(1、2．5、5、10和20μg )孵育RGC-5细胞24 h,流式细胞术检测细胞凋亡率。②制备nNOS高表达的RGC-5细胞模型。③将RGC-5细胞随机分为5组：对照组、模型组、Tat-S组( Tat-LK15运载nNOS/siR-NA转染模型细胞)、Lipo-S组( LipofectamineTM RNAiMAX运载nNOS/siRNA转染模型细胞)及 Tat-N组( Tat-LK15运载NCsiRNA转染模型细胞),通过Q-PCR及Western blot检测各组nNOS表达水平。结果 Tat-LK15与siRNA质量比为2∶1时可完全包裹siRNA,达到佳交联,此时其转染效率为(84．4±3．9)%。当 Tat-LK15剂量为20μg (6．1μmol · L-1)时才出现一定细胞毒性,细胞凋亡率高于对照组[(10．3±1．1)% vs (7．4±0．9)%,P <0．05]。造模后RGC-5细胞nNOS表达水平明显升高(P<0．05)。与模型组相比, Tat-S 组 nNOS mRNA 及蛋白表达水平降低( P <0．05),Tat-S组与Lipo-S组相比无差异(P>0．05)。结论Tat-LK15能高效转染siRNA,细胞毒性低,离体条件下可有效运载siRNA沉默nNOS的基因表达。

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